ELISA“花板”---看過之后，您再也不用擔(dān)心了

在ELISA實驗過程中時常會出現(xiàn)我們時常說的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗結(jié)果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響。

一旦出現(xiàn)“花板”，實驗結(jié)果必須放棄，不僅浪費物料和時間，而且還會出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。?

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結(jié)果較多?

“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會給實驗者判讀結(jié)果帶來麻煩。仁捷生物對“花板”現(xiàn)象進行了分析和總結(jié)，認為花板原因大多在樣品，解決辦法主要在洗滌，孵育和顯色過程也會導(dǎo)致。

 花板原因大多在樣品

“花板之所以空白、對照及質(zhì)控結(jié)果正常而標本孔異常，是因為樣品本身的原因，大部分或全部標本孔的OD值偏高，很可能是因為樣品中某些共有的物質(zhì)非特異性的吸附于固相載體，而在實驗的過程中未被除去。 

待測血清中混有紅細胞或纖維蛋白原 這兩種物質(zhì)易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈。實驗中，在較高的離心轉(zhuǎn)速（3000 /min）和較長的離心時間（>10 min）之下，血液標本被充分地離心分離之后，使紅細胞和纖維蛋白充分沉淀，可以在加樣時避免加入紅細胞和纖維蛋白，避免這兩種干擾物質(zhì)對實驗結(jié)果的影響，就可避免“花板”情況。 

 解決辦法主要在洗滌

聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清除在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻決定著實驗的成敗。

血清中存在紅細胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時間減輕或避免對實驗結(jié)果的影響。同樣，對于血液存在的非特異性的IgG很難在加樣時將其去除，那么解決的Z佳時機就是洗滌過程。 

在ELISA實驗過程中時常會出現(xiàn)我們時常說的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗結(jié)果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響。

一旦出現(xiàn)“花板”，實驗結(jié)果必須放棄，不僅浪費物料和時間，而且還會出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結(jié)果較多。

“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會給實驗者判讀結(jié)果帶來麻煩。仁捷生物對“花板”現(xiàn)象進行了分析和總結(jié)，認為花板原因大多在樣品，解決辦法主要在洗滌，孵育和顯色過程也會導(dǎo)致。

 花板原因大多在樣品
“花板之所以空白、對照及質(zhì)控結(jié)果正常而標本孔異常，是因為樣品本身的原因，大部分或全部標本孔的OD值偏高，很可能是因為樣品中某些共有的物質(zhì)非特異性的吸附于固相載體，而在實驗的過程中未被除去。 

待測血清中混有紅細胞或纖維蛋白原 這兩種物質(zhì)易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈。實驗中，在較高的離心轉(zhuǎn)速（3000 /min）和較長的離心時間（>10 min）之下，血液標本被充分地離心分離之后，使紅細胞和纖維蛋白充分沉淀，可以在加樣時避免加入紅細胞和纖維蛋白，避免這兩種干擾物質(zhì)對實驗結(jié)果的影響，就可避免“花板”情況。 

 解決辦法主要在洗滌
聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清除在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻決定著實驗的成敗。

血清中存在紅細胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時間減輕或避免對實驗結(jié)果的影響。同樣，對于血液存在的非特異性的IgG很難在加樣時將其去除，那么解決的Z佳時機就是洗滌過程。